动脉粥样硬化早期不一定有典型的粥样斑块，血管造影时也无狭窄或阻塞迹象，但患者仍可出现临床症状，因为该阶段已有内皮功能障碍及血管痉挛的改变。本实验通过观察高脂血症时血管活性物质一氧化氮、血管细胞粘附分子1 (vascular cell ad-he sion molecule-1，VCAM-l)以及细胞对血管壁粘附性的变化，探讨动脉粥样硬化早期血脂对内皮功能的损害机制。

　　饲料中含2%胆固醇、0.3%去氧胆酸钠、7.5%猪油、0.2%丙基硫氧嘧啶、5%蛋黄粉、85%基础饲料，每天进食量控制在15 g/100 g体重，分早、中、晚三餐定时定量分别给予，持续4周，第4周末从尾部抽血化验以确定模型是否复制成功。

　　SD大鼠30只，雄性，体重200:-250 g，由中南大学实验动物学部提供及饲养(室温20℃- 25℃、分笼、定时定量喂食、专人负责，无厌食及死亡)。随机分为三组：①对照组10只，基础饲料喂养20周;②高脂血症组10只，按高脂血症动物模型方法进食高脂饲料，持续20周;③吉非罗齐治疗组10只，造模方法同高脂血症组。于第5周起按60 mg/(kgd)喂服吉非罗齐治疗16周。

　　于第4周末用4%戊巴比妥钠按40 mg/kg腹腔注射麻醉，从鼠尾静脉采血1.5 mL，离心提取血清，以酶比色法经自动生化分析仪( HI~CHI 7170A)检测总胆固醇(totalcholesterol. TC)、甘油三酯(triglyceride，TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesteml，LD-LC)和高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoproteincholesterol.HDLC)水平。20周末麻醉后从心脏采血，提取血清测量IC、TG、LDLC及HDLC水平，并以酶比色法测N02一/N03一浓度(DU640分光光度仪BECKMAN USA)，以此代表一氧化氮(nitric oxide，NO)水平。

　　在主动脉以100 cmH20压力的生理盐水冲洗干净后，去除外膜脂肪组织，取根部5 mm置10%甲醛固定，常规石蜡包埋、切片，经脱蜡、脱水、封闭内源性过氧化物酶、微波修复抗原、10%正常山羊血清封闭后，分别加入VCAM- 1兔抗多克隆抗体(武汉博士德生物工程有限公司)的工作液(浓度为20 mgL)、生物素标记的羊抗兔二抗工作液、过氧化物酶标记的链酶亲和素复合物三杭工作液。DAB显色，苏木素复杂，1%盐酸酒精分色，碳酸锂反蓝，脱水，封片。通过病理图文分析系统(HPIAS- 1000)定量分析VCAM-1表达的强度‘纠、表达的范围，并计算粘附在内膜上白细胞面数密度NA，每只鼠血管取4张切片的均值。

　　4周末，高脂血症组TC和TG均比对照组升高，而NO水平下降;20周末，吉非罗齐治疗组TG比治疗前显著下降，而NO水平显著增高。

　　高脂血症组VCAM-1表达强度、范围和白细胞粘附密度均高于对照组，吉非罗齐治疗组VCAM-1表达强度、范围和白细胞粘附密度则显著低于高脂血症组。

　　光镜下，高脂血症组主动脉内皮表面粗糙、局部内皮细胞脱落，平滑肌层排列紊乱，内皮表面可见VCAM-1特异性浓染，损害较重者平滑肌层也有局部深染，并有单个核细胞嵌入;吉非罗齐治疗组内皮VCAM-1特异性染色显著减弱、表比较光滑，平滑肌层排列较整齐。

　　因是内源性一氧化氮不足，表现为血管无法充分舒张以及受刺激时易收缩。血管痉挛多数只在受刺激时(精神紧张或运动)才发生，但这种间断发作会发展为持续性病变，因为内皮功能障碍时血管壁易致炎症细胞粘附并释放炎症因子，甚至激活凝血机制形成血栓。有研究发现，及时补充足量的一氧化氮则能改善血管内皮功能，阻止以上系列改变。

　　实验结果显示，高脂喂养后的大鼠不但NO活性下降，而且炎症因子VCAM-1表达增高。高脂血症对血管内皮的损伤机制相当复杂，目前尚未完全明了。已知血脂成分本身(尤其是氧化型低密度脂蛋白)能抑制内皮NO的生成和释放，并进一步诱导细胞粘附分子的表达：其次，非氧化型LDL也可通过诱发内皮细胞胞浆内钙浓度、AP-1依赖的基因转录水平以及VCAM-1表达水平的升高来影响血管功能。VCAM-1的高表达不但提示了内皮有损害，而且能体现内皮功能受损的程度(两者呈负相关)。VCAM-1表达最显著的部位不是在内皮细胞的胞浆，而是在胞膜边缘并向外周蔓延。正常情况下，动脉内皮会有少量的VCAM-1表达，高脂血症则使其表达水平显著提高。VCAM-1的表达不是均匀分布的，主要集中在受损位置，表达强度与损害程度呈正相关，如在损伤严重、泡沫细胞较多的部位，许多深层细胞、甚至在血管中层平滑肌也有VCAM-1的表达，提示这些受脂质刺激的细胞可能发生了表型的转变，有向内皮转化并向内皮层迁移的趋势，与缺陷性的血管内皮形成有关。

　　吉非罗齐能显著降低TG水平，虽然改变TC水平并不显著，但仍能明显地抑制VCAM-1的表达及细胞粘附，提示降低TG水平和提高NO活性有利于阻止炎症因子对内皮的损伤及动脉硬化的进程。另外，Qrhard等使用抗炎药在不影响血脂的前提下，通过抑制内皮VCAM-1和ICAM-1的表达不但能抑制单个核细胞的粘附，还抑制了它的趋化和吞噬作用，最终有效地阻止高脂饮食诱导的斑块形成，这种非降脂途径的血管保护作用说明炎症因子对血管的损伤具有独立的机制。所以在调脂的同时抑制炎症因子的表达有其现实的意义。

　　总之，在动脉硬化形成之前，内皮功能下降及炎症因素的介入已较早地参与了血管损害机制，降脂治疗(吉非罗齐治疗)能有效地阻止动脉硬化的进展，这种作用与内源性一氧化氮水平的提高、内皮功能的改善有关。